熒光定量PCR檢測技術(shù)服務(wù)

實時熒光定量 PCR（Quantitative Real-time PCR，qPCR）是通過對 PCR 擴增反應(yīng)中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測實現(xiàn)對起始模板定量或定性的技術(shù)。熒光定量 PCR 常用的熒光化學(xué)材料有兩大類：熒光染料和熒光探針。熒光染料以非特異性的 SYBR Green Ⅰ為主要代表；熒光探針則包括特異性的 Taqman、分子信標(biāo)、熒光標(biāo)記引物、雜交探針等幾種。目前使用較多的方法是 SYBR Green Ⅰ染料法和 Taqman 探針法。相對定量是通過內(nèi)參基因 Ct 值與待檢基因 Ct 值經(jīng)過 2^- △△ Ct 法數(shù)學(xué)運算，得出樣本間表達量差異倍數(shù)關(guān)系。絕對定量則需要制備標(biāo)準(zhǔn)品并建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后檢測待測樣本中的基因，比對標(biāo)準(zhǔn)曲線得到基因準(zhǔn)確拷貝數(shù)。